CD44v6、E-cadherin和nm23-H1在子宫颈癌中的表达及意义

目的:探讨CD 44V 6、E-cadherin和nm 23-H 1蛋白表达与子宫颈癌的发生、发展及转移的关系。方法:采用免疫组化SP法检测50例子宫颈癌组织和10例正常子宫颈组织中CD 44v6、E-cadherin和nm 23-H 1蛋白的表达情况。结果:CD 44v6蛋白在子宫颈癌组织中的阳性率为66%,CD 44v6高表达与宫颈癌的组织学分级、淋巴结转移呈正相关(P<0.05及P<0.01)。E-cadherin和nm 23-H 1蛋白在宫颈癌组织中阳性表达率分别为62%和48%,显著低于正常宫颈组织(100.0%),P<0.05及P<0.01,但E-cadherin和nm 23-H 1阳性表达与宫颈癌的临床分期、组织学分级、间质浸润和淋巴结转移无关(P>0.05)。宫颈癌中CD 44v6表达与E-cadherin和nm 23-H 1表达呈负相关(P<0.01及P<0.05)。结论:在子宫颈癌中CD 44v6蛋白高表达和E-cadherin、nm 23-H 1蛋白低表达是判断宫颈癌的生物学行为的良好指标。     

miR-429及其目标基因HSPA4L在弱精症低活力精子中的表达

目的 探讨miR-429及其目标基因热休克蛋白A4L（HSPA4L）在弱精症患者低活力精子中的表达。方法 收集20份成年健康生育能力的精液标本和20份弱精症患者精液标本,按照 WHO第五版规定的精液分级标准,对液化后的精液进行常规参数分析;利用qRT-PCR检测精子中miR-429的表达水平;通过生物信息学手法预测miR-429 的靶点;构建HSPA4L 3′UTR双萤光素酶报告载体,采用双萤光素酶报告实验验证miR-429的靶基因;利用qRT-PCR和Western blot分别检测HSPA4L mRNA和蛋白的表达水平。结果 弱精症精子活力低于健康对照组,同时miR-429在弱精症精子中表达上调。通过生物信息学手法、双萤光素酶报告基因基检测以及转染实验发现miR-429 通过作用于HSPA4L 3′UTR来抑制HSPA4L mRNA和蛋白的表达。进一步的qRT-PCR分析发现弱精症组的HSPA4L mRNA和蛋白的表达水平下调,并且HSPA4L mRNA 表达水平与miR-429 的表达水平呈负相关（r=-0.725,P<0.05)。结论 miR-429在低活力精子中的表达上调,可能通过调控HSPA4L基因来影响精子的活力。     

不同培养基及接种密度培养脐带血间充质干细胞的比较

目的脐带血间充质干细胞为组织工程种子细胞领域研究热点,但目前仍未得到安全、高效的脐带血间充质干细胞分离培养体系,该实验研究旨在探讨脐带血间充质干细胞的适宜培养条件。方法无菌条件下取足月正常新生儿脐带血,随机分为高糖DMEM组、低糖DMEM组以及脐带血间充质干细胞组。分离提取的脐带血单个核细胞分别以1×104、1×105和1×106个细胞/ml的接种密度接种于脐带血间充质干细胞培养基中,观察3种培养基及不同接种密度培养下的细胞贴壁生长情况,并用流式细胞技术分析细胞的表面抗原。结果高糖DMEM组未见到贴壁生长的间充质干细胞,低糖DMEM组及脐带血间充质干细胞组均可见到贴壁生长的梭形成纤维样细胞(P0.05),在不同的接种密度条件下,1×105组及1×106组接种密度可见到成纤维样贴壁细胞,1×105组得到的细胞数量及细胞生长情况更好,1×104组未见到细胞贴壁生长。结论分离提取得到的脐带血单个核细胞在T25培养瓶中最佳接种密度为1×105/ml,最适合培养基为脐带血间充质干细胞培养基。     

PCDH10基因对子宫内膜腺样癌细胞抑制作用的研究

目的:研究PCDH10基因诱导子宫内膜腺样癌细胞凋亡的作用及相关机制。方法:将pc DNA3.1(+)PCDH10及pc DNA3.1(+)空质粒分别瞬时转染入子宫内膜腺样癌细胞系,通过RT-PCR和实时荧光定量PCR检测PCDH10的表达;以MTT和细胞计数测定转染后细胞的增殖能力和生长数量;应用流式细胞术检测细胞的凋亡率和细胞周期。结果:子宫内膜癌细胞转染PCDH10后,细胞的PCDH10表达升高;细胞计数和MTT试验显示转染PCDH10后的子宫内膜癌细胞的生长数量明显减少,细胞增殖受抑制(P<0.05);流式细胞凋亡率实验结果显示转染PCDH10后的子宫内膜癌细胞早期凋亡率增加;流式周期分析显示转染后的细胞G1期阻滞。结论:PCDH10基因在子宫内膜腺样癌的发生发展中起抑制作用;PCDH10基因促进对子宫内膜腺样癌细胞早期凋亡,使细胞在G1期受阻滞。     

卵巢上皮性肿瘤组织芯片CA125、p53、Ki-67、p27的表达及意义

目的：探讨癌抗原-125（CA125）、p53、Ki-67、p27在卵巢上皮性肿瘤中的表达及诊断意义。方法：应用组织芯片免疫组化染色及半定量分析的方法,检测96例卵巢癌、19例交界性肿瘤、20例囊腺瘤组织中CA125、p53、Ki-67、p27表达,分析不同组织类型之间的差异性及在病理诊断、临床分期中的意义。结果：囊腺瘤、交界瘤和卵巢癌三者CA125阳性率有显著差异（P〈0.01）,癌的阳性率明显高于囊腺瘤和交界瘤;交界瘤和癌中p53、Ki-67的阳性率均明显高于囊腺瘤（P〈0.01）;p27表达在囊腺瘤、交界瘤和癌之间未见显著差异（P〉0.05）;卵巢癌CA125和p53的强阳性率显著高于囊腺瘤和交界瘤。p53、Ki-67、p27在3种类型卵巢癌的表达未见显著差异（P〉0.05）,但黏液性囊腺癌CA125的阳性率显著低于浆液性囊腺癌和子宫内膜样癌（P〈0.01）。按TNM分期进行比较,p27表达在T1N0M0的阳性率显著高于T2N0M0和T3N0M0（P〈0.01）,而CA125、p53、Ki-67的表达在TNM各期未见显著差异（P〉0.05）。p53强阳性率与卵巢癌的组织学分级呈现逐级升高的现象,Ⅰ级强阳性率为13.3%,Ⅱ级38.5%,Ⅲ级75.0%,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：CA125和p53的阳性率以及强阳性率在卵巢癌呈现高度表达趋势,提示两者作为卵巢癌鉴别诊断指标具有重要价值;Ki-67高表达可提示肿瘤具有恶性潜能;p27表达强度可作为临床估计预后的参考指标之一。     

HPV多重感染与宫颈病变的相关性研究

目的 探讨人乳头瘤病毒(HPV)多重感染与宫颈病变的关系.方法 对2008年1月至2010年1月期间在桂林医学院附属医院妇科门诊就诊的774位女性的宫颈细胞标本进行HPV基因型分型检测,比较不同宫颈病变类型组HPV多重感染的比例.结果 本组资料中多重感染的比例为37.77%,其中以二重感染常见(85/139,61.15%),偶有六重感染(2/139,1.44%),最常见类型为HPV 16、58及HPV 16、18二重感染.HPV多重感染检出率在宫颈鳞癌组、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅲ组、CIN Ⅱ组、CIN Ⅰ组、炎症组和正常组分别为40.00%、61.11%、50.71%、39.32%、30.56%和12.28%.除宫颈鳞癌组,HPV多重感染的比例随宫颈病变级别增加而增加,各组与正常组相比,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 HPV多重感染与宫颈病变的发生有关.     

宫颈原发性浸润性腺癌临床病理分析

目的研究癌胚抗原（CEA）、抑癌基因p16蛋白和p53蛋白、增殖细胞抗原（Ki-67）抗体在原发性宫颈腺癌组织中的表达及临床病理特点。方法用快捷免疫组织化学染色法检测27例宫颈腺癌患者（腺癌组）和18例宫颈腺体增生患者（对照组）组织中CEA、p16、p53、Ki-67的表达,分析比较2组免疫组织化学标记情况,统计分析临床资料。结果腺癌组CEA、p16和p53的阳性表达分别是25例（92．6％）、23例（85．2％）和19例（70．4％）,Ki-67高表达16例（59．3％）;对照组CEA、p16、p53、Ki-67均为阴性,2组相比各项指标的表达率差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论CEA、p16、p53阳性和Ki-67高表达,提示为恶性病变。CEA、p16、p53、Ki-67联合应用在宫颈腺癌的鉴别诊断中有重要参考价值。     

纤支镜在腹腔镜手术麻醉管理中的应用

目的 应用纤支镜,结合气道压监测,探讨腹腔镜手术麻醉气道管理方法.方法 插管全身麻醉下行妇科腹腔镜手术患者20例,监测插管后平卧下(T0)、头低脚高位(T1)、气腹后(T2)、导管调节后(T3)、腹腔排气后(T4)5个时间点的平均气道压(Paw),气道峰值压(Pmax),记录纤支镜检情况、气管导管深度、术毕患者的完全清醒时间、24 h内头痛、恶心、呕吐的发生率.结果 纤支镜检指导下插管深度由平卧位下(T0)(22±1.23)cm调整至气腹后(T2)(20±1.53)cm.与其他时段相比,气腹后(T2)气道压升高,差异有统计学意义,经调整插管深度后气道压恢复正常.所有患者术毕恢复顺利.结论 纤支镜检提示当腹腔镜手术麻醉中出现气道压持续增高时存在气管导管滑入单侧支气管情况,应及时调整导管深度.纤支镜为临床腹腔镜手术的麻醉管理提供了循证医学基础.     

P16、Ki-67和Bcl-2在宫颈上皮内瘤变中的表达及应用

目的探讨P16、Ki-67、Bcl-2抗体在宫颈上皮内瘤变(CIN)中的表达及应用价值。方法用快捷免疫组化染色法检测30例正常宫颈组织和66例CIN中p16、Ki-67和Bcl-2的表达,分析比较两组的标记结果。结果 CIN中p16、Ki-67、Bcl-2的阳性率显著高于正常宫颈(﹤0.05),CINⅡ-Ⅲ的表达率显著高于CINⅠ(﹤0.05)。结论 P16、Ki-67和BCL-2抗体联合标记可作为病理诊断CIN和区分级别的重要参考指标。     

月经不同时相腹腔镜卵巢囊肿剥离术对卵巢近期功能的影响

目的：探讨月经不同时相腹腔镜卵巢囊肿剥离术对卵巢功能的影响。方法于2010年6月至2013年3月行腹腔镜卵巢囊肿剥离术68例患者,按术时不同月经时相随机分为卵泡组（n=34）和黄体组（n=34）。观察两组手术时间、术中出血量、术前及术后3、6个月时雌二醇（E2）、促卵泡激素（FSH）、促黄体生成素（LH）激素水平、术后患侧卵巢窦卵泡个数以及排卵和月经情况。结果两组手术时间比较差异无统计学意义（P〉0.05）,卵泡组手术出血量较少（P〈0.05）;术后3个月、6个月卵泡组患者血清E2、FSH和LH激素水平较术前无明显变化（P〉0.05）,术后3个月、6个月黄体组血清LH水平与术前比较无明显变化（P〉0.05）,E2水平较术前下降,FSH水平明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;两组患者术后3个月、6个月窦卵泡数与术前均无明显差异（P〉0.05）;黄体组经期延长、经量过少以及排卵异常发生几率显著高于卵泡组（P〈0.05）。结论腹腔镜下卵巢囊肿剥除术宜选择在卵泡期进行,对卵巢功能影响较小。